利用熒光蛋白可以觀測(cè)到細(xì)胞的活動(dòng)，可以標(biāo)記表達(dá)蛋白，可以進(jìn)行深入的蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)等等。特別是在癌癥研究的過(guò)程中，由于熒光蛋白的出現(xiàn)使得科學(xué)家們能夠觀測(cè)到腫瘤細(xì)胞的具體活動(dòng)，比如腫瘤細(xì)胞的成長(zhǎng)、入侵、轉(zhuǎn)移和新生。
GFP熒光蛋白在煙草葉片上的表達(dá)（LUYOR-3415RG激發(fā)光源照射下的觀察效果）
綠色熒光蛋白GFP和eGFP
綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，簡(jiǎn)稱GFP)，是一個(gè)由約238個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)，從藍(lán)光到紫外線都能使其激發(fā)，發(fā)出綠色螢光。雖然許多其他海洋生物也有類似的綠色熒光蛋白，但傳統(tǒng)上，綠色熒光蛋白（GFP）指首先從維多利亞多管發(fā)光水母中分離的蛋白質(zhì)。這種蛋白質(zhì)zui早是由下村修等人在1962年在維多利亞多管發(fā)光水母中發(fā)現(xiàn)。這個(gè)發(fā)光的過(guò)程中還需要冷光蛋白質(zhì)水母素的幫助，且這個(gè)冷光蛋白質(zhì)與鈣離子可產(chǎn)生交互作用。
藍(lán)色和青色熒光蛋白(BFP和CFP)
藍(lán)色和青色熒光蛋白變種是將綠色熒光蛋白的66位的酪氨酸殘基突變?yōu)榻M氨酸形成的。這一轉(zhuǎn)變使藍(lán)色發(fā)射光更大波長(zhǎng)為450nm，而突變?yōu)樯泛螅瑹晒獾姆逯翟?80nm。這兩個(gè)熒光蛋白的熒光都很弱，需要改造來(lái)提高折疊效率和熒光亮度。盡管進(jìn)行了改造，兩者的熒光蛋白亮度僅為增強(qiáng)型綠色熒光蛋白的25-40%。除此之外，藍(lán)色和青色熒光蛋白在不常用的光譜區(qū)應(yīng)用起來(lái)很有效，所以需要特殊的濾光片和激光光源。除了以上缺點(diǎn)，在多顏色熒光標(biāo)記和FRET實(shí)驗(yàn)中這兩種熒光蛋白得到了較多的應(yīng)用。尤其是增強(qiáng)型青色熒光蛋白，可以被氬離子激光激發(fā)脫離峰值（用457nm光譜線），而且比藍(lán)色衍生物更能抵抗光漂白作用。跟其他熒光蛋白相比，對(duì)可見(jiàn)光藍(lán)色區(qū)域的熒光蛋白并沒(méi)有引起很高的重視，在這一組熒光蛋白中主要研究集中在青色熒光蛋白中。
黃色熒光蛋白YFP
黃色熒光蛋白，又稱YFP, Yellow Fluorescent Protein.黃色熒光蛋白又稱Recombinant YFP Protein, YFP Protein, h-YFP Protein, rh-YFP Protein, recombinant human YFP Protein, YFP等.
紅色熒光蛋白R(shí)FP
Red fluorescent protein簡(jiǎn)稱RFP,RFP紅色熒光蛋白的激發(fā)光峰值為532nm，RFP紅色熒光蛋白的熒光峰值為588nm。
常規(guī)紅色熒光蛋白分為橙色熒光蛋白(550-570 nm),紅色熒光蛋白(570-620 nm)和遠(yuǎn)紅外熒光蛋白(>620 nm)3 種。mCherry是作為標(biāo)簽的好選擇,因?yàn)樗墓夥€(wěn)定性更強(qiáng)并且其具備良好的單體特性,細(xì)胞毒性低。DsRed是一種從珊瑚中分離出來(lái)的紅色熒光蛋白,具有熒光強(qiáng)、穩(wěn)定性好等優(yōu)勢(shì)。但其本身也存在許多問(wèn)題。例如,DsRed 寡聚狀態(tài)是四聚體,在進(jìn)行蛋白融合時(shí)容易形成多聚影響目標(biāo)蛋白，DsRed 在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)會(huì)產(chǎn)生毒性。
Red fluorescent protein (RFP) is a versatile biological marker for monitoring physiological processes, visualizing protein localization, and detecting transgenic expression in vivo. RFP can be excited by the 488 nm or 532 nm laser line and is optimally detected at 588 nm.
下圖為各種熒光蛋白的激發(fā)表達(dá)效果圖（采用LUYOR-3415RG激發(fā)）
熒光蛋白的激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)
熒光蛋白名稱 | 激發(fā)波長(zhǎng) | 發(fā)射波長(zhǎng) | 摩爾 | 光量子 | 結(jié)構(gòu) | 相對(duì)亮度 | |
| GFP (wt) | 395/475 | 509 | 21,000 | 0.77 | 單體 | 48 | |
| 綠色熒光蛋白（GFP、avGFP、EGFP和mEGFP綠色熒光蛋白的區(qū)別） | |||||||
| EGFP | 484 | 507 | 56,000 | 0.60 | 單體 | 100 | |
| Emerald | 487 | 509 | 575.00 | 0.68 | 單體 | 116 | |
| Superfolder GFP | 485 | 510 | 83.300 | 0.65 | 單體 | 160 | |
| Azam Green | 492 | 505 | 55,000 | 0.74 | 單體 | 121 | |
| mWasabi | 493 | 509 | 70,000 | 0.80 | 單體 | 167 | |
| TagGFP | 482 | 505 | 58,200 | 0.59 | 單體 | 110 | |
| TurboGFPGFP | 482 | 502 | 70,000 | 0.53 | 二聚體 | 102 | |
| AcGFP | 480 | 505 | 50,000 | 0.55 | 單體 | 82 | |
| ZsGreen | 493 | 505 | 43,000 | 0.91 | 四聚體 | 117 | |
| T-Sapphire | 399 | 511 | 44,000 | 0.60 | 單體 | 79 | |
| 藍(lán)色熒光蛋白 | |||||||
| EBFP | 383 | 445 | 29,000 | 0.31 | 單體 | 27 | |
| EBFP2 | 383 | 448 | 32,000 | 0.56 | 單體 | 53 | |
| Azurite | 384 | 450 | 26,200 | 0.55 | 單體 | 43 | |
| mTagBFP | 399 | 456 | 52,000 | 0.63 | 單體 | 98 | |
| 青色熒光蛋白 | |||||||
| ECFP | 439 | 476 | 32,500 | 0.40 | 單體 | 39 | |
| mECFP | 433 | 475 | 32,500 | 0.40 | 單體 | 39 | |
| Cerulean | 433 | 475 | 43,000 | 0.62 | 單體 | 79 | |
| CyPet | 435 | 477 | 35,000 | 0.51 | 單體 | 53 | |
| AmCyan1 | 458 | 489 | 44,000 | 0.24 | 四聚體 | 31 | |
| Midori-Ishi Cyan | 472 | 495 | 27,300 | 0.90 | 二聚體 | 73 | |
| TagCFP | 458 | 480 | 37,000 | 0.57 | 單體 | 63 | |
| mTFP1 (Teal) | 462 | 492 | 64,000 | 0.85 | 單體 | 162 | |
| 黃色熒光蛋白 | |||||||
| EYFP | 514 | 527 | 83.400 | 0.61 | 單體 | 151 | |
| Topaz | 514 | 527 | 94,500 | 0.60 | 單體 | 169 | |
| Venus | 515 | 528 | 92,200 | 0.57 | 單體 | 156 | |
| mCitrine | 516 | 529 | 77,000 | 0.76 | 單體 | 174 | |
| YPet | 517 | 530 | 104,000 | 0.77 | 單體 | 238 | |
| TagYFP | 508 | 524 | 64,000 | 0.60 | 單體 | 118 | |
| PhiYFP | 525 | 537 | 124,000 | 0.39 | 單體 | 144 | |
| ZsYellow1 | 529 | 539 | 20,200 | 0.42 | 四聚體 | 25 | |
| mBanana | 540 | 553 | 6,000 | 0-7 | 單體 | 13 | |
| 橙色熒光蛋白 | |||||||
| Kusabira Orange | 548 | 559 | 51,600 | 0.60 | 單體 | 92 | |
| Kusabira Orange2 | 551 | 565 | 63.800 | 0.62 | 單體 | 118 | |
| mOrange | 548 | 562 | 71,000 | 0.69 | 單體 | 146 | |
| mOrange2 | 549 | 565 | 58,000 | 0.60 | 單體 | 104 | |
| Tdomato | 554 | 581 | 69,000 | 0.69 | 二聚體 | 142 | |
| dTomato-Tandem | 554 | 581 | 138,000 | 0.69 | 單體 | 283 | |
| TagRFP | 555 | 584 | 100,000 | 0.48 | 單體 | 142 | |
| TagRFP-T | 555 | 584 | 81,000 | 0.41 | 單體 | 99 | |
| DsRed | 558 | 583 | 75,000 | 0.79 | 四聚體 | 176 | |
| DsRed2 | 563 | 582 | 43.800 | 0.55 | 四聚體 | 72 | |
| DsRed-Express (T1) | 555 | 584 | 38,000 | 0.51 | 四聚體 | 58 | |
| DsRed-Monomer | 556 | 586 | 35,000 | 0.10 | 單體 | 10 | |
| mTangerine | 568 | 585 | 38,000 | 0.30 | 單體 | 34 | |
| 紅色熒光蛋白 | |||||||
| mRuby | 558 | 605 | 112,000 | 0.35 | 單體 | 117 | |
| mApple | 568 | 592 | 75,000 | 0.49 | 單體 | 109 | |
| mStrawberry | 574 | 596 | 90,000 | 0.29 | 單體 | 78 | |
| AsRed2 | 576 | 592 | 56,200 | 0.05 | 四聚體 | 8 | |
| mRFP1 | 584 | 607 | 50,000 | 0.25 | 單體 | 37 | |
| JRed | 584 | 610 | 44,000 | 0.20 | 二聚體 | 26 | |
| mCherry | 587 | 610 | 72,000 | 0.22 | 單體 | 47 | |
| HcRed1 | 588 | 618 | 20,000 | 0.015 | 二聚體 | 1 | |
| mRaspberry | 598 | 625 | 86,000 | 0.15 | 單體 | 38 | |
| dKeima-Tandem | 440 | 620 | 28,800 | 0.24 | 單體 | 21 | |
| HcRed-Tandem | 590 | 637 | 160,000 | 0.04 | 單體 | 19 | |
| mPlum | 590 | 649 | 41,000 | 0.10 | 單體 | 12 | |
| AQ143 | 595 | 655 | 90,000 | 0.04 | 四聚體 | 11 | |
GFP熒光蛋白在植物葉片上的表達(dá)（瀏覽更多熒光蛋白表達(dá)的效果）
上海峰志儀器銷售的熒光蛋白激發(fā)光源波段選擇指南
| 指定 | 激發(fā) | 發(fā)射 | 適用于 |
| UV - 紫外線 | 360 - 380nm | 415nm長(zhǎng)波通 | Dapi |
| VI - 紫羅蘭 | 400 - 415nm | 450nm長(zhǎng)波通 | 藍(lán)色熒光蛋白 青色熒光蛋白 |
| RB - 皇家藍(lán) | 440-460nm | 500nm長(zhǎng)波通 | 綠色熒光蛋白 |
| RB - 皇家藍(lán) | 440-460nm | 500 - 560nm帶通 | 綠色熒光蛋白 |
| CY - 青色 | 490 - 515nm | 550nm長(zhǎng)波通 | 黃色熒光蛋白 |
| GR - 綠色 | 510 - 540nm | 600nm長(zhǎng)波通 | 紅色熒光蛋白 |
http://www.yifengxin.cn/laboratory/jifaguangyuan/LUYOR-3415RG.html
如果要觀察熒光蛋白（Fluorescent Protein)的表達(dá)，可以選擇美國(guó)路陽(yáng)LUYOR-3415系列雙波長(zhǎng)熒光蛋白激發(fā)光源。如希望提供更多詳細(xì)信息，可直接聯(lián)系上海峰志儀器有限公司的銷售客服。
本文部分圖片和內(nèi)容來(lái)自：https://www.luyoruv.com/news/news2/213.html
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