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質粒蛋白標簽中的熒光蛋白

作者:上海峰志 時間:2022-10-16 19:25:44瀏覽819 次

信息摘要:

熒光蛋白在某種定義下可以說是革新了生物學研究——運用熒光蛋白可以觀測到細胞的活動,可以標記表達蛋白,可以進行深入的蛋白質組學實驗等等。特別是在癌癥研究的過程中,由于熒光蛋白的出現使得科學家們能夠觀測到腫瘤細胞的具體活動,比如腫瘤細胞的成長、入侵、轉移和新生。

質粒蛋白標簽(protein tag)中的熒光蛋白

熒光蛋白在某種定義下可以說是革新了生物學研究——運用熒光蛋白可以觀測到細胞的活動,可以標記表達蛋白,可以進行深入的蛋白質組學實驗等等。特別是在癌癥研究的過程中,由于熒光蛋白的出現使得科學家們能夠觀測到腫瘤細胞的具體活動,比如腫瘤細胞的成長、入侵、轉移和新生。

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綠色熒光蛋白(GreenFluorescent Protein,簡稱GFP )

在美國西北海岸所盛產的一種名為Aequorea victoria的水母中發現的一種可以發出綠色熒光的蛋白質。GFP早是在1962年由日本科學家下村修發現,由238氨基酸組成的單體蛋白質,蛋白分子約為27kD。

eGFP增強型綠色熒光蛋白

eGFP 標簽蛋白,是增強型綠色熒光蛋白eGFP,激發波長為488nm,發射波長為507nm,其是由野生型綠色熒光蛋白GFP通過氨基酸突變和密碼子優化而來的。相對于GFP,eGFP熒光強度更強、熒光性質更穩定。同時載體中構建的Kozak序列使得含有eGFP的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。不用破碎組織細胞和不加任何底物,直接通過熒光顯微鏡就能在活細胞中發出綠色熒光,實時顯示目的基因的表達情況,而且熒光性質穩定,被譽為活細胞探針。其自發熒光,不需用目的基因的抗體或原位雜交技術就可推知目的基因在細胞中的定位等情況。同時細胞內的其它產物不會干擾標簽蛋白檢測,從而使其檢測更顯得快速、簡便、靈敏度高而且重現性。其低消耗、高靈敏度檢測,十分適用于高通量的藥物篩選。

eYFP增強型黃綠色熒光蛋白

eYFP標簽蛋白為增強型黃綠色熒光蛋白eYFP,激發波長為513nm,發射波長為527nm,其是由野生型黃綠色熒光蛋白YFP通過氨基酸突變和密碼子優化而來的。

eCFP增強型青色熒光蛋白

eCFP標簽蛋白為增強型青色熒光蛋白eCFP,激發波長為433nm或453nm,發射波長為475nm或501nm,其是由野生型青色熒光蛋白CFP通過氨基酸突變和密碼子優化而來的。

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